浮游菌檢測標準操作規程SOP
目 的:建立潔淨(區)室浮游菌檢測標準操作規程。
范 圍:適用於潔淨(區)室浮游菌監測。
責 任:QC人員負責實施,QA人員負責監督。
內 容:
1取樣前準備工作:
1.1 依據檢測區域的取樣點數,按照《培養基配製、滅菌標準操作程序》製備適量的營養瓊脂培養基。
1.2 在超淨工作枱內,以無菌操作法將配製好的營養瓊脂培養基以每皿約15ml的裝量分裝,待培養基凝固後移出潔淨區。
1.3 將製備的營養瓊脂平皿倒置於隔水式恆溫水浴培養箱內於30~35℃培養48小時。取出逐個檢查,確認無菌落數後即可使用。
1.4採樣:將上述製備好的營養瓊脂平皿交與QA人員取樣。
2.儀器、設備和培養基:
2.1所用的儀器、設備和培養基:
2.1.2 浮游菌採樣器
2.1.3培養皿(φ90mm×15mm)
2.1.4 培養基(營養瓊脂培養基)
2.1.5恆溫培養箱
2.2 儀器、設備、培養基的要求:
2.2.1 浮游菌採樣器:
2.2.1.1 浮游菌採樣器必須要有流量計和定時器。
2.2.1.2 應嚴格按儀器說明書的要求進行操作。
2.2.1.3 採樣器必須按儀器的檢定周期,定期對儀器作檢定,以保證測試數據的可靠性,檢驗項目有:定時器,轉盤轉速,流量計。
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浮游菌檢測標準操作規程 |
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1.2.1.4 每次測試前應先接通電源,啟動真空抽氣泵,然後調節流量計和定時器。
2.2.1.5 空氣採樣量根據需要選定,已知採樣器的流量(L/min),設定採樣時間(min)兩者相乘即得採樣量(L)。
2.2.1.6 採樣口必須用便於消毒及化學性能穩定的材料製造,採樣管嚴禁滲漏,內壁應光滑,採樣管的長度應根據測定點的高度定,儘量減少彎曲。
3. 測試方法:
3.1 測試用儀器、培養皿表面必須嚴格消毒。
3.1.1 採樣器進入被測房間前先用消毒劑滅菌。
3.1.2 用消毒劑擦淨培養皿的外表面。
3.1.3 採樣前,先用消毒劑消毒採樣器的頂盤、轉盤以及罩子的內外面,採樣結束再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。
3.1.4 採樣口及採樣管使用前必須高溫滅菌,如用消毒劑對採樣管的外壁、內壁進行消毒,應將管中的殘留液倒掉並晾乾。
3.1.5 採樣者應穿戴與被測潔淨區域相應的工作服,在轉盤上放入或調換培養皿前,雙手用消毒劑消毒。
3.2 採樣程序:
3.2.1 儀器經消毒後先不放入培養皿,開動真空泵抽氣,使儀器的殘餘消毒劑蒸發,時間不少於5min,並調好流量、轉盤轉速。
3.2.2 關閉真空泵,放入培養皿,蓋上蓋子後調節採樣品縫隙高度。
3.2.3 置採樣器於採樣點後,開啟採樣器、轉動定時器,根據採樣量設定
採樣時間。
4 測試規則:
4.1 測試狀態:
4.1.1 浮游菌測試前微生物限度檢查室已經消毒過。
4.1.2 測試狀態為靜態測試,並在報告中註明測試狀態。
4.2 測試人員:
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4.2.1 測試人員必須穿戴符和被測環境級別的工作服。
4.2.2 靜態測試時,室內人員不得多於2人。
4.3 測試時間:
4.3.1 對單向流,測試應在淨化空調系統正常運行不少於10min後開始。
4.3.2 對非單向流,測試應在淨化空調系統正常運行不少於30min後開始。
4.4 zui少採樣點數目及其佈置,zui小採樣量,見下表:
面積(m2) |
潔淨度級別 |
|||||
A |
B |
C |
||||
驗證 |
監測 |
驗證 |
監測 |
驗證 |
監測 |
|
<10 |
2~3 |
1 |
2 |
1 |
2 |
-- |
≥10~<20 |
4 |
2 |
2 |
1 |
2 |
-- |
≥20~<40 |
8 |
3 |
2 |
1 |
2 |
-- |
≥40~<100 |
16 |
4 |
4 |
1 |
2 |
-- |
≥100~<200 |
40 |
-- |
10 |
-- |
3 |
-- |
≥200~400 |
80 |
-- |
20 |
-- |
6 |
-- |
400 |
160 |
-- |
40 |
-- |
13 |
-- |
4.4.1 工作區測點位置離地0.8m~1.5m左右,送風口測點位置離開送風面30cm左右;可在關鍵設備或關鍵工作活動範圍處增加測點。
4.4.2 每個採樣點一般採樣一次
4.4.3 對於單向流或送風口,採樣器採樣管口朝向應正對氣流方向;對於非單向流,採樣管口向上。
4.4.4佈置採樣點時,至少應離開塵粒較集中的迴風口1m以上。
4.4.5採樣時,測試人員應站在採樣口的下風側。
5 培養:取樣結束後將平皿復倒置隔水式恆溫水浴培養箱內於30~35℃培養48小時。並以未採樣的營養瓊脂平皿作對照皿。
6菌落計數:
6.1用肉眼直接計數,然後用5-10倍放大鏡檢查,是否遺漏。
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6.2 若培養皿上有2個或2個以上菌落重疊,可分辨時,仍以2個或2個以上的菌落計數。計數:培養結束,將上述培養後的平皿取出,逐個點計菌落數,必要時用放大鏡檢查,並記錄。
7 結果計算:
7.1 平均菌落數的計算見下式:
平均菌落數 m=
式中:m為該房間(或區域)的平均菌落數;
m1、m2‥‥‥mn為該房間(或區域)各取樣點的菌落數;
N為培養皿總數
8 結論:
8.1 潔淨室(區)內的平均菌落數必須低於所選定的評定標準。
8.2 若某潔淨室(區)的平均菌落數超過評定標準,則必須對此區域先行消毒,然後重新測試兩次,測試結果必須合格。